Miksi on välttämätöntä, että samaa restriktioentsyymiä käytetään lohkaisemaan (leikkaamaan) molempien organismien DNA, jota käytetään siirtogeenisen organismin muodostamiseen?

Miksi on välttämätöntä, että samaa restriktioentsyymiä käytetään lohkaisemaan (leikkaamaan) molempien organismien DNA, jota käytetään siirtogeenisen organismin muodostamiseen?
Anonim

Vastaus:

Katso alempaa…

Selitys:

Tietyissä sekvensseissä leikatut restriktioentsyymit niin, että sama restriktioentsyymi on käytettävä, koska se tuottaa fragmentteja, joilla on samat komplementaariset tahmea päät, jolloin sidokset muodostuvat niiden välille.

On olemassa tiettyjä yhteensopivia restriktiokohtia, joita voidaan käyttää yhdessä. Xho1 ja Sal1 ovat esimerkkejä. Niiden tarttuvat päät sopivat yhteen, joten ne voidaan liittää yhteen. Mutta ligaatio tappaa sekä Xho1- että Sal1-sivuston, joten et voi käyttää kumpaakaan näistä leikkaamalla uudelleen (ligaatiokohdissa).

Voit myös käyttää eksonukleaasia tai PCR: ää saadaksesi useimmat tahmeat päät (5 tai 3 päällekkäiset sivut) tylsiksi sivustoiksi - tällä tavoin voit sitoa tylpään leikkauspaikkaan - mutta tämä yleensä tappaa myös tylsä sivuston.