Mikä on proteiinien SDS-PAGE?

Mikä on proteiinien SDS-PAGE?
Anonim

Vastaus:

Se on proteiinien erottaminen niiden molekyylipainon perusteella.

Selitys:

SDS-PAGE on proteiinien erottaminen sähkökentässä niiden molekyylipainon perusteella.

Proteiinit denaturoidaan kuumentamalla välillä 70 - 100 ° C yhdisteiden, kuten 2-merkaptoetanolin tai ditiotreitolin, ja SDS: n (natriumdodekyylisulfaatti) läsnä ollessa. Merkaptoetanoli tai ditiotreitoli hajottaa proteiinin disulfidisidokset ja aiheuttaa sen hajoamisen ja muuttuu lineaariseksi (kuten pitkä nauha, jossa ei ole taitoksia). SDS auttaa avautumisprosessissa ja kattaa myös proteiinin negatiivisella varauksella.

Sitten seos levitetään polyakryyliamidigeelille (PAGE-bitti SDS-PAGE: ssa) ja sähkövirta. Negatiivisesti varautuneet proteiinit liikkuvat sähkökentässä. PAGE estää suurempia proteiineja liikkumasta hyvin nopeasti pieniin proteiineihin verrattuna (PAGE toimii kuin seula). Tuloksena on, että suuret proteiinit pysyvät lähellä geelin alkua, kun taas pienet proteiinit ovat siirtyneet edelleen PAGE: han.

Voit nähdä SDS-PAGE-toiminnon alla olevassa videossa: