Vastaus:
Jotta ne pysyvät ennallaan …
Selitys:
Restriktio Entsyymejä käytetään hyvin pieninä määrinä, mutta ne ostetaan yleensä hieman suuremmista eristä.
Jos mitään muuta, olet yleensä mieluummin tehnyt erilaisia testejä saman erän kanssa. Siksi ostettu erä on säilytettävä pitkään.
Useimmat entsyymit ovat täysin tyytyväisiä puskuriinsa 4 asteessa Celsiusta jonkin aikaa, mutta lopulta heikkenevät. 24 tuntia on yleensä hyväksytty raja.
Pidemmän aikavälin varastointiin pakkaus on pakattava. -20C on standardi, ja se pitää sen useita kuukausia. Jopa pidempiä aikoja (esim. Yksi tai useampi vuosi) -70C on normi.
Se on pakastettava nopeasti ja pienissä säiliöissä (esim. Eppendorfs), jotta vältetään liian usein sulatuksen / jäädyttämisen.
Jotta vältettäisiin proteiinin vaurioituminen sellaisissa alhaisissa lämpötiloissa, stabilointiaineita voidaan lisätä / lisätä, kuten DTT (Di-Thio-Treitol), seerumin albumiini ja ennen kaikkea glyseroli (5-50%)
Kummallista kyllä -20 ° C: ssa on käytettävä 50% glyserolia, kun taas -70 ° C: ssa glyserolia ei todellakaan tarvita, vaikka sen lisääminen voi auttaa proteiinin vakauttamisessa.
Miksi restriktioentsyymit ovat tärkeitä DNA-sormenjälkitunnistuksessa?
Restriktioentsyymit leikkaavat DNA-molekyylin vain tietyssä emäsmallissa. (kuten kuvassa) Koska kaikilla organismeilla (itsenäisiltä zygoteilta) on ainutlaatuinen DNA, restriktioentsyymit leikkaavat DNA: n eri asemissa ja eri taajuuksilla. Tämä johtaa erilaisiin pituuksiin / kokoihin sisältyvien "palojen" lukumäärään. Restriktiofragmentin pituuspolymorfismit (RFLP: t) on analyysi tietystä restriktioentsyymistä tuotetuista fragmenteista - fragmentit ovat osittain ladattuja ja ne reagoivat sähkökenttiin. Entsyymi on tärkeä, koska t
Miksi restriktioentsyymit ovat tärkeitä rekombinantti-DNA-tekniikalle?
Restriktioentsyymi on merkittävä rekombinantti-dna-teknologian väline - kaikki restriktioentsyymit tarkastavat DNA-molekyylin spesifisen tunnistussekvenssin seerumissa. kun se saa tietyn tunnistussekvenssin, se sitoutuu kohtaan ja leikkaa kukin kahdesta kaksoiskierteen säikeestä tietyissä kohdissa hydrolysoimalla fosfodiesterisidoksia. RAJOITUKSEN SYÖTTÖJÄRJESTELMÄT KOSKEVAT MOLEKULAARISET SOVELLUKSET.
Miksi on tärkeämpää, että restriktioentsyymit tunnistavat palindromiset seqeunces?
Vaikka restriktioendonukleaasi on endonukleaasi eli nukleiinihappoa hajottava entsyymi, se ei tuhoa sattumanvaraisesti DNA-molekyyliä. Entsyymit leikkaavat vain palindromisia sekvenssejä pienempien DNA-fragmenttien muodostamiseksi. Restriktioentsyymejä käytetään leikkaamaan prokaryoottista alkuperää olevaa pyöreää DNA-molekyyliä. Tämäntyyppinen endonukleaasi tuottaa usein tahmeita päät, jotka auttavat rekombinantti-DNA: n muodostamisessa, ts. Leikkaukseen voidaan lisätä vieras DNA-fragmentti (joka sisältää halutun geeni