Miten tiedemiehet eristävät DNA: n tutkiakseen sitä?

Miten tiedemiehet eristävät DNA: n tutkiakseen sitä?
Anonim

Vastaus:

Tätä varten on pari askelta, älä ohita huonoa englantiani, toivon, että ymmärrätte prosessin.

Selitys:

Tämä ei ole niin vaikeaa kuin luulisi.

Oletetaan, että haluamme eristää DNA: n pois vasikan kateenkorvasta, sinun on noudatettava näitä ohjeita (ne ovat samat omenalle niin paljon kuin tiedän, mutta pieniä muunnelmia):

  1. Ota 3 kappaletta 3 grammaa ja leikkaa se pieniksi paloiksi niin pieneksi kuin mahdollista.

  2. Laita se tehosekoittimeen, jossa on 75 ml suolaliuos-natriumsitraattia (SSC), ja varmista, että sekoittimen terä on kokonaan peitetty SSC: ssä, joten lisää tarvittaessa kateenkorva.

    SSC varmistaa, että solukalvot ovat liuenneet.

    Pidä sekoittamista, kunnes kaikki on sileä.

  3. Laita se sentrifugin putkeen ja laita se toiseen putkeen, jotta sentrifugi ei katkea

  4. Aseta putki sentrifugiin 20 minuutin ajan 5000 kierrosta minuutissa

  5. Kun saat putket ulos sentrifugista, sinun pitää nähdä kaksi komponenttia. Pohjassa on kiinteä aine, tätä kutsutaan pelletiksi ja tämä pitää solun ytimet DNA: n kanssa. Näet myös nestemäisen aineen, jota kutsutaan supernatantiksi ja joka koostuu SSC: stä liuenneiden solukalvojen kanssa.

  6. Kaada supernatantti yhteen nesteen liikkeeseen, tätä kutsutaan dekantoimiseksi ja tämä jättää sinut pelletille.

  7. Laita pieni määrä 2,2 M NaCl: a putkeen pelletin kanssa, niin että pelletti peitetään juuri NaCl: lla. NaCl aiheuttaa DNA: ta ympäröivän proteiinin saostumisen.

  8. Sekoita se tyhjällä koeputkella tai sekoitussauvalla. Lopulta sinun pitäisi saada kaksi komponenttia. Pohjan proteiinit ja viskoosi neste sen päälle.

  9. Poista viskoosi neste pipetillä ja varmista, että et ota mitään proteiineja viskoosin nesteen kanssa. (erittäin pieniä proteiinikappaleita on erittäin vaikea välttää, mutta yritä välttää mahdollisimman monta proteiinia)

  10. Laita viskoosi neste, jonka pipetit, dekantterilasiin ja lisää siihen 2 kertaa niin paljon etanolia. Mutta lisää etanoli varovasti, koska et halua sekoittaa sitä DNA: n kanssa. Etanolin ja viskoosin nesteen välisessä rajapinnassa tulee näkyä DNA-kuplien tulo.

  11. Sekoita varovasti lasitangolla, DNA latautuu negatiivisesti siten, että se tarttuu sauvaan.

  12. Laita se koeputkeen ja liuota se SSC: hen.

Erikoiskone voi sitten kertoa, kuinka paljon DNA on eristetty ja kuinka puhdas se on.