PBR322 on plasmidi, jossa on kaksi restriktiokohtaa EcoRI: lle, kun taas T4-faagi-DNA: lla on kolme restriktiokohtaa sille. Näitä kahta DNA: ta käsiteltiin EcoRI: llä ja annettiin juosta agaroosigeelillä. Millainen kuvio saadaan geelistä?

PBR322 on plasmidi, jossa on kaksi restriktiokohtaa EcoRI: lle, kun taas T4-faagi-DNA: lla on kolme restriktiokohtaa sille. Näitä kahta DNA: ta käsiteltiin EcoRI: llä ja annettiin juosta agaroosigeelillä. Millainen kuvio saadaan geelistä?
Anonim

Vastaus:

Virheellinen kysymys, T4: llä on noin 40 sivustoa EcoR1: lle, ei 3 …

pBR322: ssa on vain 1 kohta EcoR1: lle AMP-resistenssitekijägeenin ja TET-geenin välillä …

Selitys:

T4 digestit: (kiitos, Springer Verlag!)

kuva otettu osoitteesta

© Springer-Verlag 1981

Mutta jos kysymyksesi on hypoteettisempi:

sekä pBR322 että T4-genomit ovat pyöreitä, joten:

pBR322: 2cuts = 2 fragmenttia,

T4: 3cuts = 3 fragmenttia.

Agaroosigeelillä käydään pBR-kaistalla kaksi kaistaa, T4-kaistalla 3 nauhaa, UNLESS 2 tai useampia fragmentteja on yhtä suuria tai lähellä.. Tällöin he muuttavat enemmän tai vähemmän samalla nopeudella ja ovat erottamattomia. Suhteellinen G / C-A / T-suhde vaikuttaa myös.

Joten loppujen lopuksi, jos fragmentit tässä hypoteettisessa esimerkissä ovat kooltaan erilaisia, 2 bändiä pBR: lle, 3 T4: lle …